ForeDirect RT-qPCR жинағы
Жинақ сипаттамасы:
◮РНҚ тазарту процестерінсіз жағынды жинақтарынан тікелей нақты уақыттағы РНҚ күшейту үшін.Бұл жинақ qRT-ПТР циклдарын бір сағат ішінде аяқтайды.Фермент қоспасы кері транскриптазаның, Hot-Start Taq ДНҚ полимеразасының, RNase ингибиторының оңтайландырылған қоспасы болып табылады.Реакция буфері барлық қажетті құрамдастарды, соның ішінде оңтайландырылған буфер құрамдастарын, Mg2+, dUTP және dNTP.
Сипаттама
ForeDirect RT-qPCR жинағы РНҚ тазарту процестерінсіз жағынды жинақтарынан тікелей нақты уақыттағы РНҚ күшейтуге арналған.Бұл жинақ qRT-ПТР циклдарын бір сағат ішінде аяқтайды.Фермент қоспасы кері транскриптазаның, Hot-Start Taq ДНҚ полимеразасының, RNase ингибиторының оңтайландырылған қоспасы болып табылады.Реакция буфері барлық қажетті құрамдастарды, соның ішінде оңтайландырылған буфер құрамдастарын, Mg2+, dUTP және dNTP.
Техникалық сипаттамалар
100Т
Жинақтың құрамдас бөліктері
| Нуклеин қышқылын бөлетін агент |
| РНҚ қорғанысы |
| 2× RT-qPCR буфері |
| Фермент қоспасы(Taq&M-MLV) |
| Нұсқаулар |
ПТР қолдану
1. ПТР реакциясы түтіктері қысқа центрифугаланған соң, оларды күшейту құралының үлгі резервуарына салыңыз.
2. Жылулық хаттама
| Қадам | Температура | Уақыт | Циклдер | |
| 1 | Кері транскрипция | 50℃ | 15 мин | 1 |
| 2 | Алдын ала денатурация | 95℃ | 1 мин | 1 |
| 3 | Денатурация | 95℃ | 10 секунд | 42 |
| 4 | Жылыту/кеңейту | 60℃ | 30 секунд | |
Ескерту:Флуоресцентті сигнал әр циклдің ұзарту қадамынан кейін бірден анықталды.
3. Орнатқаннан кейін файлды сақтап, реакция бағдарламасын іске қосыңыз.
Жұмыс қадамдары
Реагенттерді дайындау алдында жиынтықтағы барлық реагенттерді бөлме температурасында ерітіп, ақырын араластыру керек.
Реагент дайындау
1. Нуклеин қышқылын босату қоспасын дайындаңыз
| Құрамдас | Үлгіге немесе бақылауға арналған көлем |
| Нуклеин қышқылын бөлетін агент | 5 мкл |
| РНҚ қорғанысы | 0,5 мкл |
2. Реакция қоспасын дайындаңыз
| Құрамдас | Үлгіге немесе бақылауға арналған көлем |
| 2× RT-qPCR буфері | 15 мкл |
| Фермент қоспасы(Taq&M-MLV) | 1,5 мкл |
| Праймерлер мен зондтар | 1 мкл |
Сақтау және сақтау мерзімі
- Жинақты -20 температурада сақтау керек± 5℃.Жарамдылық мерзімі 12 ай.
-Қайталанатын мұздату-еріту циклдарынан аулақ болыңыз (<5 цикл).
