Тікелей RT-qPCR жинағы
Жинақ сипаттамасы:
◮ Бірегей реакция буфері бар Foregene әзірлеген Foreasy кері транскриптаза мен Foreasy HS Taq ДНҚ полимеразасын қолданатын тікелей RT-qPCR жинағы бұл жинақты күшті қарсылық пен үйлесімділікпен жасайды және ол Foregene Lysis жүйесін үлгі ретінде реакцияны пайдалануды тікелей сынай алады.Бұл жинақ COVID-19 нуклеин қышқылын анықтау жинағын және басқа патогенді бактерияларды нуклеин қышқылын анықтау жинағын әзірлеу үшін қолданылуы мүмкін.
Сипаттама
Тікелей RT-qPCR жинағы бөлек оралған RT-qPCR буферін және жоғары тиімді ферментті қамтамасыз етеді.қоспасы(Taq、M-MLV、RI)， оны артқы жинақтар мен жүйені жасауға ыңғайлы етедіреттеу, қарапайым тексеру аясында.
Техникалық сипаттамалар
500Т, 50000Т
Жинақтың құрамдас бөліктері
| Жинақтың мазмұны (20 мкл реакция жүйесі) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 Т | 50 000 Т | |
| Тікелей ферменттер қоспасы | 500 мкл×1 | 50 мл×1 |
| 2× Тікелей RT-qPCR буфері | 1 мл×5 | 500 мл×1 |
| Нұсқау | 1 | 1 |
Жұмыс қадамдары
Реагенттерді дайындау алдында жиынтықтағы барлық реагенттерді бөлме температурасында ерітіп, ақырын араластыру керек.
A: Дайындаңыз of үлгі және реагент
1. Дайындалған РНҚ үлгісін (РНҚ үлгісін шығарып алу және тазарту үшін Foregene Total RNA оқшаулау жинағы сериясы жинағын пайдалану ұсынылады) немесе үлгі крекинг өнімін (Foregene Lysis жүйесін пайдалану ұсынылады), арнайы праймерлерді (10 мкм) және басқа да тиісті шығын материалдарын, құралды дайындаңыз.
2. 2× Direct RT-qPCR буферін, RNase-Free ddH2O және 20× ROX анықтамалық бояуын (егер ол болса) салыңыз.'қажет) мұз салынған қорапта, оларды табиғи түрде балқытып, ақырын араластырыңыз.
B: Дайындаңыз of RT-qPCR жүйесі
Кесте 1 : Дайындаңыз of RT-qPCR sжүйе
| Құрамдас | Көлемі | Соңғы концентрация |
| 2× Тікелей RT-qPCR буфері | 10 мкл | 1× |
| Тікелей ферменттер қоспасы | 1мкл | |
| Алға праймер (10 мкм) | 0,8 мкл | 50-900нМ |
| Кері праймер (10 мкм) | 0,8 мкл | 50-900нМ |
| Зонд (4 мкм) | 1мкл | 200нМ |
| Үлгі (РНҚ немесе Лизат) | X мкл | |
| 20×ROX анықтамалық бояу | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) мкл | |
| Жалпы көлемі | 20мкл |
C: Орнату the RT-qPCR реакция бағдарламасы
Кесте 2 : RT-qPCR реакцияon бағдарламасы орнату (үшін мысал: екі-қадам әдіс)
| Қадам | Температура | Уақыт | Циклдер | Мазмұны | |
| 1 | 50℃ | 15 мин | 1* | 1 | Кері транскрипция |
| 2 | 95℃ | 1 мин | 1 | Алдын ала денатурация | |
| 3 | 95℃ | 10 сек | 40-45 | Денатурация | |
| 60℃ | 30 сек 2* | Жылыту/кеңейту | |||
Сақтау және сақтау мерзімі
- Жинақты -20 температурада сақтау керек± 5℃.Жарамдылық мерзімі 12 ай.
-Қайталанатын мұздату-еріту циклдарынан аулақ болыңыз (<5 цикл).
