QuickEasyᵀᴹ Нақты уақыттағы ПТР жинағы-Такман
Сипаттамалар
2× QuickEasyTMQuickEasy ұсынған нақты ПТР Микс-ТакманTMНақты уақыттағы ПТР жинағы-Такман жинағы нақты флуоресцентті зондтарды пайдалана отырып, нақты уақыттағы ПТР күшейту реакциясына арналған жаңа буынның негізгі араластыру жүйесі.Оның негізгі Foregene HS Taq ДНҚ полимеразасы Foregene әрі қарай оңтайландырылған ПТР жүйесімен бірге пайдаланылатын антиденелерді модификациялауға негізделген, жоғары спецификалық және күшейту тиімділігіне ие.Кәдімгі ПТР қоспасымен салыстырғанда оның күшейту қабілеті күшті және сәйкессіздік деңгейі төмен.Оны спецификалық емес күшейтуді азайту және ПТР дәлдігін жақсарту үшін флуоресценттік сандық ПТР реакциясында қолдануға болады.Бұл өнімнің ерекшелігі мен реакция сезімталдығын айтарлықтай жақсарта алады.Сонымен қатар, ROX ішкі анықтамалық бояу ретінде қамтамасыз етілді.
QuickEasyTMНақты уақыттағы ПТР жинағы-Такман жинағы шаблон мөлшеріне кең қолдану аясына ие және әртүрлі сандық аймақтарда жақсы стандартты қисық сызығын ала алады және жақсы қайталану және жоғары сенімділікпен мақсатты гендерді дәл сандық түрде анықтап, анықтай алады.
Техникалық сипаттамалар
200 дайындық,500 дайындық,1000 дайындық,2000 дайындық
Жинақтың құрамдас бөліктері
QuickEasyTMНақты уақыттағы ПТР жинағы-Такман(20мклжүйесі) | ||||
Жинақтың мазмұны | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Дайындық | 500 дайындық | 1000 дайындық | 2000 дайындық | |
2×ЖылдамЖеңілTM Нағыз ПТР Араластырыңыз-Тақман | 1 мл×2 | 1,7 мл×3 | 1,7 мл×6 | 1,7 мл×12 |
20×ROX анықтамалық бояуы | 200мкл | 0,5 мл | 1 мл | 1 мл×2 |
DNase жоқ ddH2O | 1,7 мл | 1,7 мл×2 | 10 мл | 20 мл |
IFU | 1дана | 1дана | 1дана | 1дана |
Ерекшеліктер мен артықшылықтар
■ Бірегей ПТР оңтайландыру жүйесі 2×QuickEasy жасайдыTMНақты ПТР Микс-Такман үйлесімдірек.
■ Ыстық іске қосу Foregene HS Taq Polymerase жоғары күшейту тиімділігіне, жоғары күшейту сезімталдығына және жоғары күшейту ерекшелігіне ие.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman генотиптеу және көшіру санының вариациясын анықтау және дәл нәтижелерді алу үшін пайдаланылуы мүмкін дәйектілікке тән зондты анықтаудың сезімталдығы мен ерекшелігін жақсарту үшін Foregene оңтайландырған бірегей жүйені пайдаланады.
■ Бұл өнім ROX ішкі анықтамалық бояуымен бірге жеткізіледі, оны ұңғымалар арасындағы сигналдық фонды және сигнал қатесін жою үшін пайдалануға болады, бұл тұтынушыларға сандық ПТР құралдарының әртүрлі түрлерінде қолдануға ыңғайлы.
Жинақ қолданбасы
■ Үлгі сандық талдау үшін флуоресцентті сандық ПТР;
■ Cдәстүрлі ПТР күшейту;
■ Аллельді анықтау үшін пайдалануға болады.
Сақтау және сақтау мерзімі
Жинақты қараңғы жерде -20 ° C температурада сақтау керек;егер ол жиі қолданылса, оны 4°C температурада қысқа уақыт ішінде сақтауға да болады (10 күн ішінде пайдалануға болады).
Нақты уақыттағы ПТР праймерін жобалау принциптері
Алға және кері праймер
Нақты уақыттағы ПТР үшін праймер дизайны өте маңызды.Праймерлер ПТР күшейтудің ерекшелігі мен тиімділігіне байланысты және келесі принциптерге сілтеме жасай отырып жобалануы мүмкін:
Праймер ұзындығы: 18-30б.
GC мазмұны: 40-60%.
Tm мәні: Primer 5 сияқты праймерді жобалау бағдарламалық құралы праймердің Tm мәнін бере алады.Жоғарғы және төменгі ағынды праймерлердің Tm мәндері мүмкіндігінше жақын болуы керек.Tm есептеу формуласын да қолдануға болады: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).ПТР жүргізген кезде, әдетте, жасыту температурасы ретінде праймер Tm мәнінен 5 °C төмен температура таңдалады (жасыту температурасының сәйкес жоғарылауы ПТР реакциясының ерекшелігін арттыруы мүмкін).
Праймерлер мен ПТР өнімдері:
Жобалық праймер ПТР күшейту өнімінің ұзындығы жақсырақ 100-150 бит.
Үлгінің қайталама құрылымдық аймағындағы дизайн праймерлерінен мүмкіндігінше аулақ болу керек.
Жоғарғы және төменгі ағынды праймерлердің 3′ ұштары арасында 2 немесе одан да көп қосымша негіздердің пайда болуына жол бермеңіз.
Primer 3′ терминал негізі 3 қосымша қатарынан G немесе C болуы мүмкін емес.
Праймерлердің өздері қосымша құрылымдарға ие бола алмайды, әйтпесе ПТР күшейтуге әсер ететін шаш қыстырғыш құрылымы пайда болады.
ATCG праймер тізбегінде мүмкіндігінше біркелкі таратылуы керек, ал 3′ терминалды негізді T ретінде болдырмау керек.
1-қосымша:Cell Direct RT-qPCR Kit құрамдастарының қосымша бумасы
1.Жасушаның лизисі ерітіндісі
| |||
Жинақтың құрамдас бөліктері (24 ұңғыма лизис жүйесі / ұңғыма) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 Т | 500 Т | ||
БөлімI | Буфер CL | 20 мл | 100 мл |
Foregene Protease Plus II | 400 мкл | 1 мл × 2 | |
Буфер ST | 1 мл × 2 | 10 мл | |
БөлімII | ДНҚ өшіргіш | 400 мкл | 1 мл × 2 |
2.RT Микс
| |
Жинақтың құрамдас бөліктері (20 мкл реакция жүйесі) | DRT-01011-B1 |
200 Т | |
5× Тікелей RT микс | 800 мкл |
RNase жоқ ddH2O | 1,7 мл × 2 |
| ||
Жинақтың құрамдас бөліктері (20 мкл реакция жүйесі) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 Т | 1000 Т | |
2× Тікелей qPCR Mix-SYBR | 1 мл × 2 | 1,7 мл × 6 |
50× ROX анықтамалық бояуы | 40 мкл | 200 мкл |
RNase жоқ ddH2O | 1,7 мл | 10 мл |