Біз әрқашан жағдайдың өзгеруіне сәйкес ойланып, тәжірибе жасаймыз және өсеміз.Біз бай ақыл мен денеге қол жеткізуді, сондай-ақ кәсіби магниттік вирустық Rna нуклеин қышқылын оқшаулауды тазартуға арналған алдын ала оралған жиынтықтардың көтерме дилерлері үшін өмір сүруді мақсат етеміз, Біздің фирма «тұтастыққа негізделген, ынтымақтастық құрылған, адамдарға бағытталған, ұтысқа бағытталған ынтымақтастық» процедуралық принципімен жұмыс істейді.Біз қоршаған ортаның түкпір-түкпірінен келген бизнесменмен оңай серіктестік орната аламыз деп үміттенеміз.
Біз әрқашан жағдайдың өзгеруіне сәйкес ойланып, тәжірибе жасаймыз және өсеміз.Біз ақыл-ой мен дененің бай болуына, сонымен қатар өмір сүруге қол жеткізуді мақсат етемізҚытайдың әмбебап РНҚ ДНҚ реагенттері және нуклеин қышқылын автоматты түрде тазарту, Біз жаһандық тұтынушыларымыздың сұраныстарын қанағаттандыруға ұмтыламыз.Тауарларымыз бен қызметтеріміздің ауқымы тұтынушылардың талаптарын қанағаттандыру үшін үздіксіз кеңейіп келеді.Біз өмірдің барлық салаларындағы жаңа және ескі тұтынушыларды болашақ іскерлік қарым-қатынастар және өзара табысқа жету үшін бізбен байланысу үшін қарсы аламыз!
Нұсқаулықтар:

 Біз әрқашан жағдайдың өзгеруіне сәйкес ойланып, тәжірибе жасаймыз және өсеміз.Біз бай ақыл мен денеге қол жеткізуді, сондай-ақ кәсіби магниттік вирустық Rna нуклеин қышқылын оқшаулауды тазартуға арналған алдын ала оралған жиынтықтардың көтерме дилерлері үшін өмір сүруді мақсат етеміз, Біздің фирма «тұтастыққа негізделген, ынтымақтастық құрылған, адамдарға бағытталған, ұтысқа бағытталған ынтымақтастық» процедуралық принципімен жұмыс істейді.Біз қоршаған ортаның түкпір-түкпірінен келген бизнесменмен оңай серіктестік орната аламыз деп үміттенеміз.
Көтерме дилерлерҚытайдың әмбебап РНҚ ДНҚ реагенттері және нуклеин қышқылын автоматты түрде тазарту, Біз жаһандық тұтынушыларымыздың сұраныстарын қанағаттандыруға ұмтыламыз.Тауарларымыз бен қызметтеріміздің ауқымы тұтынушылардың талаптарын қанағаттандыру үшін үздіксіз кеңейіп келеді.Біз өмірдің барлық салаларындағы жаңа және ескі тұтынушыларды болашақ іскерлік қарым-қатынастар және өзара табысқа жету үшін бізбен байланысу үшін қарсы аламыз!

Мәселені талдау нұсқаулығы

Сізде кездесетін мәселелердің келесі талдауыӨсімдіктердің жалпы саныRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

Айналдыру бағанасы бітеліп қалған

Спин бағанының бітелуі РНҚ шығымының төмендеуіне немесе тіпті РНҚ алу үшін тазартыла алмауына әкеледі, ал алынған РНҚ сапасы төмен болады.

Жалпы себептерді талдау:

1. Үлгі толығымен бұзылмаған.

Үлгінің толық емес фрагментациясы ДНҚ-тазалау бағанын бұғаттауы мүмкін, бұл РНҚ кірісі мен сапасына да әсер етуі мүмкін.Үлгіні фрагментациялау кезінде үлгілердің жасуша қабырғалары мен жасуша мембраналары сияқты тіндерді мүмкіндігінше ыдырату үшін сұйық азоттың жеткілікті мөлшерінде жылдам ұнтақтауды ұсынамыз.Полифенол полисахаридтерінің өсімдік үлгілері үшін Plant Total RNA Isolation Kit Plus пайдалануды ұсынамыз.

2. ДНҚ-тазалау бағанынан оқшауланған үстіңгі затты сорып алыңыз, мүмкін болатын жасуша қалдықтарын сорыңыз.

Аспирацияланған жасуша қалдықтарының түйіршіктері РНҚ адсорбциясы процедуралары кезінде тек РНҚ бағанасын бітеп тастауы мүмкін (процедураның 5-қадамын, полисахаридті полифенол процедурасының 6-қадамын қараңыз).Жасуша қалдықтарын сорып алмау үшін осы үстіңгі затты сору кезінде абай болуды ұсынамыз.

3. Үлгінің бастапқы мөлшері тым үлкен.

Үлгіні шамадан тыс пайдалану үлгінің толық емес фрагментациясына немесе PRL1 буфері немесе PSL1 буфері арқылы жасушалардың толық лизисіне әкеледі, нәтижесінде тазарту операциялары үшін тазарту бағанасы бітеліп қалады.Өсімдіктің жалпы РНҚ оқшаулау жинағы операциялық үлгіні бір рет тазарту үшін бастапқы максимум 50 мг құрайды.Полифенол полисахаридтерінің өсімдік үлгілері үшін Өсімдіктердің жалпы РНҚ изоляция жинағы Plus қолданбасын пайдалануды ұсынамыз.

4. Центрифуганың температурасы тым төмен.

Үлгі тінінің сұйық азотпен бұзылуын қоспағанда, РНҚ-ны толығымен оқшаулау және тазарту, барлық қадамдар бөлме температурасында (20-25 °C) орындалады.Кейбір төмен температуралы центрифугалардың температурасы 20 °C-тан төмен болады, бұл ДНҚ-тазалау бағанында және/немесе тек РНҚ-бағанында бітелуді тудыруы мүмкін.Бұл орын алса, центрифуга температурасын 20-25 °C-қа орнатыңыз және лизис қоспасын және/немесе этанолды бөлу үстіңгі затын 37 °C дейін алдын ала қыздырыңыз.

Алынған РНҚ жоқ немесе РНҚ шығымы төмен

Қалпына келтіру тиімділігіне әсер ететін әдетте көптеген факторлар бар, мысалы: үлгі РНҚ мазмұны, жұмыс әдісі, элюция көлемі және т.б.

Төмендегідей жалпы себептерді талдау:

1. Операция кезінде мұз ваннасы немесе төмен температурада (4°C) центрифугалау орындалды.

Ұсыныс: бүкіл процессте бөлме температурасында (15-25°C) жұмыс істеңіз, мұз ваннасын және төмен температурада центрифугалауды жасамаңыз.

       2.Үлгіні дұрыс сақтамау немесе үлгіні ұзақ уақыт сақтау салдарынан РНҚ бұзылған.

Ұсыныс: Жаңадан жиналған үлгілерді сұйық азотта тез мұздату керек, содан кейін -80°C температурада ұзақ уақыт сақтау керек, үлгілерді қайта-қайта мұздату мен ерітуге жол бермеу керек;немесе үлгілерді РНҚ тұрақтандырғышының RNAlater ерітіндісіне (жануар үлгілері) дереу сіңіріңіз.

       3.Үлгінің жеткіліксіз бөлінуі және лизисі тазарту бағанының бітелуіне әкеледі.

Ұсыныс: Тіндерді ұнтақтау кезінде тіннің жеткілікті түрде ұнтақталғанына көз жеткізіңіз және оны алдын ала дайындалған PSL1 буферіне жылдам жіберіңіз (β-ME дұрыс пропорциясы қосылғанын растаңыз, процедураның 1-қадамын қараңыз).

4. Элюент қате қосылды.

Ұсыныс: RNase-Free ddH екеніне көз жеткізіңіз₂Тазарту колоннасының мембранасының ортасына О тамшылатылады.

5. PSL2 буферіне немесе PRW2 буферіне абсолютті этанолдың дұрыс көлемі қосылмаған.

Ұсыныс: Нұсқауларды орындаңыз, PSL2 буферіне және PRW2 буферіне абсолютті этанолдың дұрыс көлемін қосыңыз және жинақты қолданар алдында жақсылап араластырыңыз.

6.Тін үлгісінің мөлшері сәйкес емес.

Ұсыныс: PSL1 буферінің 500 мкл үшін 50 мг ұлпаны пайдаланыңыз.Тым көп тіндерді пайдалану экстракцияланған РНҚ мөлшерін азайтады және алынған РНҚ тазалығы да төмендейді.Біз сынаманың бастапқы дозасы бір РНҚ экстракциясы операциясы үшін 50 мг-ден аспауы керек екенін қатаң түрде ұсынамыз.

7. Сәйкес емес элюция көлемі немесе толық емес элюция.

Ұсыныс: тазарту колоннасының элюент көлемі 50-200 мкл;егер элюция әсері қанағаттанарлық болмаса, алдын ала қыздырылған RNase-Free ddH қосқаннан кейін бөлме температурасында уақытты ұзарту ұсынылады.₂O, мысалы, 5-10 мин.

8.Тазарту бағанасында PRW2 буферімен жуғаннан кейін этанол қалдығы бар.

   Ұсыныс: бос түтік 1 минут бойы центрифугаланса және PRW2 буферінде жуудан кейін әлі де этанол қалса, бос түтікті центрифугалау уақытын 2 минутқа дейін арттыруға немесе қалдық этанолды толығымен жою үшін тазарту бағанын бөлме температурасында 5 минутқа қоюға болады.

9. Жинақ дұрыс пайдаланылмады.

   Ұсыныс: Полифенолды полисахаридтердің өсімдік үлгілері үшін Өсімдіктің жалпы РНҚ оқшаулау жинағы сияқты жалпы жинақтарды пайдалану тамаша РНҚ үлгілерін ала алмауы мүмкін.Полифенолды полисахаридті өсімдік үлгілері үшін арнайы әзірленген Plant Total RNA IsolationKit Plus пайдалануды ұсынамыз.Полифенол және полисахаридті өсімдік үлгілерінен РНҚ алу үшін арнайы әзірленген жинақ.

OD260/OD280 мәні төмен

РНҚ элюциясы ddH₂O және спектрофотометр көрсеткіштері үшін пайдаланылған OD260/OD280 төмен мәндерге әкеледі.10 мМ Tris-HCl, pH 7,5 (RNase-Free ddH орнына) пайдалануды ұсынамыз.₂O RNA элюциясы үшін) салыстырмалы түрде дұрыс OD260/OD280 мәндерін алу үшін 19-беттегі “РНҚ концентрациясы және тазарту талдаулары” бөлімін қараңыз.

Тазартылған РНҚ бұзылады

Тазартылған РНҚ сапасы үлгіні сақтау, RNase ластануы және манипуляция сияқты факторларға байланысты.

Жалпы себептерді талдау:

1. Ұлпа үлгілері жинаудан кейін уақытында сақталмаған.

    Ұсыныс: Егер тін үлгілері жиналғаннан кейін уақытында пайдаланылмаса, оларды төмен температурада сұйық азотта дереу сақтаңыз немесе сұйық азотта жылдам мұздатылғаннан кейін ұзақ мерзімді сақтау үшін оларды -80°C дейін ауыстырыңыз немесе үлгілерді РНҚ тұрақтандырғышының RNAlater ерітіндісіне дереу батырыңыз (жануар үлгілері).РНҚ экстракциясы үшін жаңадан жиналған тін үлгілерін пайдаланып көріңіз.

2.Ұлпа үлгілерін қайталап мұздату және еріту.

   Ұсыныс: Ұлпа үлгілерін сақтау кезінде консервациялау үшін оларды кішкене бөліктерге кесіп, үлгілерді қайталап мұздату мен ерітуден туындаған РНҚ деградациясын болдырмау үшін пайдалану кезінде олардың бір бөлігін алып тастаған дұрыс.

3.RNase операция бөлмесінде енгізіледі немесе бір рет қолданылатын қолғаптар, маскалар және т.б.

   Ұсыныс: РНҚ экстракциясы бойынша эксперименттер РНҚ-ның жекелеген операцияларында жақсы орындалады, ал зертханалық үстелді эксперимент алдында тазалау керек, ал РНҚ-ны ең көп мөлшерде енгізуден туындаған РНҚ деградациясын болдырмау үшін эксперимент кезінде бір реттік қолғаптар мен маскалар кию керек.

4. Пайдалану кезінде реагент RNase арқылы ластанған.

   Ұсыныс: қатысты эксперименттер үшін өсімдіктің жалпы РНҚ экстракция жинақтарының жаңа сериясымен ауыстырыңыз.

5. РНҚ манипуляциясы үшін пайдаланылатын центрифуга түтіктері мен тамшуыр ұштары RNase-мен ластанған.

Ұсыныс: РНҚ экстракциясында қолданылатын центрифуга түтіктерінің, тамшуыр ұштарының, тамшуырлардың және т.б. барлығында RNase жоқ екеніне көз жеткізіңіз.

Нұсқаулықтар:

Өсімдіктің жалпы РНҚ оқшаулау жинағы нұсқаулығы