Тазартылмаған сынамаға арналған 2 × концентрленген премикс үшін Қытай өндірушісі Нақты уақыттағы сандық ПТР тікелей мультиплексті зонд Qpcr Mix Plus U
Ұйым «ғылыми менеджмент, жоғары сапа және тиімділік басымдылығы, Қытай үшін жоғары сатып алушы нақты уақыттағы нақты уақыттағы ПТР тікелей мультиплексті зондының тазартылмаған сандық ПТР тікелей мультиплексті зондының Qpcr Mix Plus U үшін Қытай үшін өндірушісі, біздің бизнес клиенттерге маңызды және қауіпсіз жоғары сапалы өнімдерді ұсынуға арналған.
Ұйым «ғылыми менеджмент, жоғары сапа және тиімділік басымдылығы, сатып алушы үшін ең жоғары» процедура тұжырымдамасын сақтайды.Қытай Taq ДНҚ полимераза және Qpcr, Біздің компанияның күшті күші бар және тұрақты және мінсіз сату жүйесі бар.Біз үйдегі және шетелдегі барлық тұтынушылармен өзара тиімділік негізінде сенімді іскерлік қарым-қатынастар орнатқанымызды қалаймыз.
Нақты уақыттағы ПТР праймерін жобалау принциптері
Алға және кері праймер
Нақты уақыттағы ПТР үшін праймер дизайны өте маңызды.Праймерлер ПТР күшейтудің ерекшелігі мен тиімділігіне байланысты және келесі принциптерге сілтеме жасай отырып жобалануы мүмкін:
- Праймер ұзындығы: 18-30б.
- GC мазмұны: 40-60%.
- Tm мәні: Primer 5 сияқты праймерді жобалау бағдарламалық құралы праймердің Tm мәнін бере алады.Жоғарғы және төменгі ағынды праймерлердің Tm мәндері мүмкіндігінше жақын болуы керек.Tm есептеу формуласын да қолдануға болады: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).ПТР жүргізген кезде, әдетте, жасыту температурасы ретінде праймер Tm мәнінен 5 °C төмен температура таңдалады (жасыту температурасының сәйкес жоғарылауы ПТР реакциясының ерекшелігін арттыруы мүмкін).
- Праймерлер мен ПТР өнімдері:
- Жобалық праймер ПТР күшейту өнімінің ұзындығы жақсырақ 100-150 бит.
- Үлгінің қайталама құрылымдық аймағындағы дизайн праймерлерінен мүмкіндігінше аулақ болу керек.
- Жоғарғы және төменгі ағынды праймерлердің 3′ ұштары арасында 2 немесе одан да көп қосымша негіздердің пайда болуына жол бермеңіз.
- Primer 3′ терминал негізі 3 қосымша қатарынан G немесе C болуы мүмкін емес.
- Праймерлердің өздері қосымша құрылымдарға ие бола алмайды, әйтпесе ПТР күшейтуге әсер ететін шаш қыстырғыш құрылымы пайда болады.
- ATCG праймер тізбегінде мүмкіндігінше біркелкі таратылуы керек, ал 3′ терминалды негізді T ретінде болдырмау керек.
Қосымша1:CтікелейRT-qPCR Жинақ құрамдас бөлігіt қосымша пакет
1.Жасуша лизисі ерітіндісі
Жасушаның лизисі ерітіндісі | |||
Жинақтың құрамдас бөліктері (24 ұңғыма лизис жүйесі / ұңғыма) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 Т | 500 Т | ||
БөлімI | Буфер CL | 20 мл | 100 мл |
Foregene Protease Plus II | 400 мкл | 1 мл × 2 | |
Буфер ST | 1 мл × 2 | 10 мл | |
БөлімII | ДНҚ өшіргіш | 400 мкл | 1 мл × 2 |
RT Микс | |
Жинақтың құрамдас бөліктері (20 мкл реакция жүйесі) | DRT-01011-B1 |
200 Т | |
5× Тікелей RT микс | 800 мкл |
RNase жоқ ddH2O | 1,7 мл × 2 |
qPCR қоспасы | ||
Жинақтың құрамдас бөліктері (20 мкл реакция жүйесі) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 Т | 1000 Т | |
2× Тікелей qPCR Mix-Taqman | 1 мл × 2 | 1,7 мл × 6 |
20× ROX анықтамалық бояуы | 40 мкл | 200 мкл |
RNase жоқ ddH2O | 1,7 мл | 10 мл |
Ұйым «ғылыми менеджмент, жоғары сапа және тиімділік басымдылығы, Қытай үшін жоғары сатып алушы нақты уақыттағы нақты уақыттағы ПТР тікелей мультиплексті зондының тазартылмаған сандық ПТР тікелей мультиплексті зондының Qpcr Mix Plus U үшін Қытай үшін өндірушісі, біздің бизнес клиенттерге маңызды және қауіпсіз жоғары сапалы өнімдерді ұсынуға арналған.
Қытай үшін өндірушіҚытай Taq ДНҚ полимераза және Qpcr, Біздің компанияның күшті күші бар және тұрақты және мінсіз сату жүйесі бар.Біз үйдегі және шетелдегі барлық тұтынушылармен өзара тиімділік негізінде сенімді іскерлік қарым-қатынастар орнатқанымызды қалаймыз.
Нақты уақыттағы ПТР праймерін жобалау принциптері
Алға және кері праймер
Нақты уақыттағы ПТР үшін праймер дизайны өте маңызды.Праймерлер ПТР күшейтудің ерекшелігі мен тиімділігіне байланысты және келесі принциптерге сілтеме жасай отырып жобалануы мүмкін:
- Праймер ұзындығы: 18-30б.
- GC мазмұны: 40-60%.
- Tm мәні: Primer 5 сияқты праймерді жобалау бағдарламалық құралы праймердің Tm мәнін бере алады.Жоғарғы және төменгі ағынды праймерлердің Tm мәндері мүмкіндігінше жақын болуы керек.Tm есептеу формуласын да қолдануға болады: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).ПТР жүргізген кезде, әдетте, жасыту температурасы ретінде праймер Tm мәнінен 5 °C төмен температура таңдалады (жасыту температурасының сәйкес жоғарылауы ПТР реакциясының ерекшелігін арттыруы мүмкін).
- Праймерлер мен ПТР өнімдері:
- Жобалық праймер ПТР күшейту өнімінің ұзындығы жақсырақ 100-150 бит.
- Үлгінің қайталама құрылымдық аймағындағы дизайн праймерлерінен мүмкіндігінше аулақ болу керек.
- Жоғарғы және төменгі ағынды праймерлердің 3′ ұштары арасында 2 немесе одан да көп қосымша негіздердің пайда болуына жол бермеңіз.
- Primer 3′ терминал негізі 3 қосымша қатарынан G немесе C болуы мүмкін емес.
- Праймерлердің өздері қосымша құрылымдарға ие бола алмайды, әйтпесе ПТР күшейтуге әсер ететін шаш қыстырғыш құрылымы пайда болады.
- ATCG праймер тізбегінде мүмкіндігінше біркелкі таратылуы керек, ал 3′ терминалды негізді T ретінде болдырмау керек.
Қосымша1:CтікелейRT-qPCR Жинақ құрамдас бөлігіt қосымша пакет
1.Жасуша лизисі ерітіндісі
Жасушаның лизисі ерітіндісі | |||
Жинақтың құрамдас бөліктері (24 ұңғыма лизис жүйесі / ұңғыма) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 Т | 500 Т | ||
БөлімI | Буфер CL | 20 мл | 100 мл |
Foregene Protease Plus II | 400 мкл | 1 мл × 2 | |
Буфер ST | 1 мл × 2 | 10 мл | |
БөлімII | ДНҚ өшіргіш | 400 мкл | 1 мл × 2 |
RT Микс | |
Жинақтың құрамдас бөліктері (20 мкл реакция жүйесі) | DRT-01011-B1 |
200 Т | |
5× Тікелей RT микс | 800 мкл |
RNase жоқ ddH2O | 1,7 мл × 2 |
qPCR қоспасы | ||
Жинақтың құрамдас бөліктері (20 мкл реакция жүйесі) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 Т | 1000 Т | |
2× Тікелей qPCR Mix-Taqman | 1 мл × 2 | 1,7 мл × 6 |
20× ROX анықтамалық бояуы | 40 мкл | 200 мкл |
RNase жоқ ddH2O | 1,7 мл | 10 мл |
Нұсқаулықтар: