Иммуноглобулиндер (Ig) деп те аталатын антиденелер антигендермен арнайы байланысатын гликопротеидтер болып табылады.
 
Кәдімгі антиденелерді дайындау жануарларды иммундау және антисарысуларды жинау арқылы жасалады.Сондықтан антисарысуда әдетте басқа байланысты емес антигендерге және сарысудағы басқа ақуыз компоненттеріне қарсы антиденелер болады.Жалпы антиген молекулаларында негізінен бірнеше түрлі эпитоптар болады, сондықтан кәдімгі антиденелер де бірнеше түрлі эпитоптарға қарсы антиденелердің қоспасы болып табылады.Тіпті бір эпитопқа қарсы бағытталған сарысудағы әдеттегі антиденелер әлі де әртүрлі В жасушаларының клондары шығаратын гетерогенді антиденелерден тұрады.Сондықтан әдеттегі сарысулық антиденелер поликлональды антиденелер немесе қысқаша поликлональды антиденелер деп те аталады.
 
Моноклональды антидене (моноклональды антидене) бір В жасушасының клоны шығаратын және тек белгілі бір эпитопқа қарсы бағытталған жоғары біркелкі антидене.Ол әдетте гибридома технологиясы арқылы дайындалады — гибридома антиденелер технологиясы В жасушаларын спецификалық антиденелерді және шексіз өсу қабілеті бар миелома жасушаларын В-жасушалық гибридомаларға бөлу қабілетімен біріктіретін жасушаларды біріктіру технологиясына негізделген.Бұл гибридома жасушасы ата-аналық жасушаға тән қасиеттерге ие.Ол миелома жасушалары сияқты шексіз және өлмейтін in vitro көбейе алады және көкбауыр лимфоциттері сияқты арнайы антиденелерді синтездеп, шығара алады.Клондау арқылы бір гибридома жасушасынан алынған моноклоналды линияны, яғни гибридома жасушаларының линиясын алуға болады.Ол өндіретін антиденелер бір антигендік детерминантқа, яғни моноклоналды антиденелерге қарсы жоғары гомогенді антиденелер.
 
Антиденелер бір немесе бірнеше Y-тәрізді мономерлер (яғни, моноклоналды антиденелер немесе поликлоналды антиденелер) түрінде болады.Әрбір Y-тәрізді мономер екі бірдей ауыр тізбекті және екі бірдей жеңіл тізбекті қамтитын 4 полипептидтік тізбектен тұрады.Жеңіл тізбек және ауыр тізбек молекулалық салмағына қарай аталады.Y-тәрізді құрылымның жоғарғы жағы антигенді байланыстыру орны болып табылатын ауыспалы аймақ болып табылады.(Detai био-моноклоналды антиденелер тұжырымдамасынан үзінді)
 
Антиденелер құрылымы
Ауыр тізбек
Сүтқоректілердің Ig ауыр тізбектерінің бес түрі бар, олар грек әріптерімен α, δ, ε, γ және μ деп аталады.Сәйкес антиденелер IgA, IgD, IgE, IgG және IgM деп аталады.Әртүрлі ауыр тізбектер мөлшері мен құрамы бойынша ерекшеленеді.α және γ құрамында шамамен 450 аминқышқылдары бар, ал μ және ε құрамында шамамен 550 аминқышқылдары бар.
Әрбір ауыр тізбекте екі аймақ бар: тұрақты аймақ және айнымалы аймақ.Бір типті барлық антиденелер бірдей тұрақты аймаққа ие, бірақ әртүрлі типтегі антиденелер арасында айырмашылықтар бар.Ауыр тізбектердің тұрақты аймақтары γ, α және δ үш Ig доменінен, оның икемділігін арттыру үшін топса аймағынан тұрады;ауыр тізбектердің μ және ε тұрақты аймақтары 4 Ig доменінен тұрады.Әртүрлі В жасушалары өндіретін антидененің ауыр тізбегінің айнымалы аймағы әртүрлі, бірақ бір В жасушасы немесе жасуша клоны шығаратын антидененің айнымалы аймағы бірдей және әрбір ауыр тізбектің айнымалы аймағының ұзындығы шамамен 110 амин қышқылын құрайды., Және бір Ig доменін құрайды.
 
Жеңіл тізбек
Сүтқоректілерде жеңіл тізбектердің тек екі түрі бар: ламбда типі және каппа типі.Әрбір жеңіл тізбектің екі байланысқан домені бар: тұрақты аймақ және айнымалы аймақ.Жеңіл тізбектің ұзындығы шамамен 211 ~ 217 амин қышқылын құрайды.Әрбір антидененің құрамындағы екі жеңіл тізбек әрқашан бірдей.Сүтқоректілер үшін әрбір антиденедегі жеңіл тізбектің тек бір түрі бар: каппа немесе ламбда.Кейбір төменгі сатыдағы омыртқалыларда, мысалы, шеміршекті балықтарда (шеміршекті балықтар) және сүйекті балықтарда иота (иота) типі сияқты жеңіл тізбектердің басқа түрлері де кездеседі.
 
Fab және Fc сегменттері
Fc сегменті антиденелерді белгілеу үшін ферменттермен немесе флуоресцентті бояғыштармен тікелей біріктірілуі мүмкін.Бұл ELISA процесі кезінде антидене пластинадағы тойтармалар бөлігі, сонымен қатар иммунопреципитация, иммуноблотинг және иммуногистохимияда екінші антидене танылатын және байланысатын бөлігі.Антиденелер папаин сияқты протеолитикалық ферменттердің көмегімен екі F(ab) сегментіне және бір Fc сегментіне гидролизденуі мүмкін немесе олар топса аймағынан пепсинмен үзіліп, бір F(ab)2 сегментіне және бір Fc сегментіне гидролизденуі мүмкін.IgG антиденелерінің фрагменттері кейде өте пайдалы.Fc сегментінің болмауына байланысты F(ab) сегменті антигенмен тұнбаға түспейді және оны in vivo зерттеулерінде иммундық жасушалар басып алмайды.Молекулярлық фрагменттердің кішігірім болуына және айқаспалы байланыс функциясының болмауына байланысты (Fc сегментінің болмауына байланысты) Fab сегменті әдетте функционалдық зерттеулерде радиобелгілеу үшін пайдаланылады, ал Fc сегменті негізінен гистохимиялық бояуда блоктаушы агент ретінде қолданылады.
 
Айнымалы және тұрақты аймақтар
Ауыспалы аймақ (V аймағы) N тізбегінің N тізбегінің 1/5 немесе 1/4 бөлігінде (шамамен 118 амин қышқылы қалдықтары бар) және L тізбегінің N-соңғысының жанында 1/2 (шамамен 108-111 амин қышқылы қалдықтары бар) орналасқан.Әрбір V аймағында тізбек ішілік дисульфидтік байланыстар арқылы түзілген пептидтік сақина бар және әрбір пептидтік сақина шамамен 67-75 аминқышқылдарының қалдықтарын қамтиды.V аймағындағы аминқышқылдарының құрамы мен орналасуы антидененің антигенмен байланысу ерекшелігін анықтайды.V аймағындағы амин қышқылдарының түрлерi мен реттiлiгi үздiксiз өзгерiп тұруына байланысты байланыстырушы антиген ерекшелiктерi әртүрлi антиденелердің көптеген түрлері түзілуі мүмкін.L және H тізбегінің V аймақтары сәйкесінше VL және VH деп аталады.VL және VH-де кейбір жергілікті аймақтардың аминқышқылдарының құрамы мен тізбегі вариацияның жоғары дәрежесіне ие.Бұл аймақтар гипервариативті аймақтар (HVR) деп аталады.V аймағындағы HVR емес бөліктердің аминқышқылдарының құрамы мен орналасуы салыстырмалы түрде консервативті, ол жақтау аймағы деп аталады.VL-де әдетте 24-тен 34-ке дейін және 89-дан 97-ге дейінгі аминқышқылдарының қалдықтарында орналасқан үш гипервариативтік аймақ бар.VL және VH үш HVR сәйкесінше HVR1, HVR2 және HVR3 деп аталады.Рентгендік кристалды дифракцияны зерттеу және талдау гипервариативтік аймақ шынымен антидене антигенінің байланысатын жері екенін дәлелдеді, сондықтан оны комплементарлылықты анықтайтын аймақ (CDR) деп атайды.VL және VH HVR1, HVR2 және HVR3 сәйкесінше CDR1, CDR2 және CDR3 деп атауға болады.Әдетте, CDR3 жоғары өзгергіштік дәрежесіне ие.Гипервариативтік аймақ сонымен қатар Ig молекулаларының идиотиптік детерминанттары бар негізгі орын болып табылады.Көп жағдайда Н тізбегі антигенмен байланысуда маңыздырақ рөл атқарады.
Тұрақты аймақ (С аймағы)Н тізбегінің 3/4 немесе 4/5 бөлігінде (шамамен 119 амин қышқылынан С терминалына дейін) C ұшына жақын және 1/2 бөлігінде (шамамен 105 амин қышқылы қалдықтары бар) L тізбегінің С ұшына жақын орналасқан.H тізбегінің әрбір функционалды аймағында шамамен 110 амин қышқылы қалдықтары бар және дисульфидтік байланыстармен байланысқан 50-60 аминқышқылдарының қалдықтарынан тұратын пептидтік сақинадан тұрады.Бұл аймақтың аминқышқылдарының құрамы мен орналасуы бір жануардың Ig изотипі L тізбегінде және бір типті H тізбегінде салыстырмалы түрде тұрақты.Дәл солай, ол тек сәйкес антигенмен арнайы байланыса алады, бірақ оның С аймағының құрылымы бірдей, яғни антигендік қасиеті бірдей.Жылқы адамға қарсы IgG екіншілік антидене (немесе антидене) әртүрлі экзотоксиндерге қарсы екі антиденелердің (IgG) тіркесімімен біріктірілуі мүмкін.Бұл қайталама антиденелерді дайындау және флуоресцеинді, изотоптарды, ферменттерді және басқа таңбаланған антиденелерді қолдану үшін маңызды негіз болып табылады.
 
 
Қосымша тауарлар:
Cell Direct RT-qPCR жинағы