ПТР туылуы
ПТР (полимеразды тізбекті реакция)
Полимеразды тізбекті реакцияның ойлап табылғанына 30 жылдан астам уақыт өтті.30 жылдан астам бүкіл әлем бойынша көптеген ғалымдар толықтыруды және жетілдіруді жалғастырғаннан кейін, ПТР технологиясы бүкіл өмір туралы ғылым саласындағы ең кең және жиі қолданылатын және ең маңызды негізгі зерттеу әдісі болды.
Дәстүрлі ПТР технологиясын кеңінен қолдану негізінде жасалған TouchDown ПТР, Нақты уақыттағы ПТР, Мульти ПТР және т.б., сондай-ақ жаңадан пайда болған Цифрлық ПТР (цифрлық ПТР) көптеген ғылыми зерттеушілердің зерттеу әдістерін айтарлықтай байытты және қазіргі өмір туралы ғылымдардың, әсіресе молекулалық биологияның даму процесін айтарлықтай жеделдетті, адам өмірі мен табиғатын зерттеуге үлкен үлес қосты.
Дәстүрлі ПТР технологиясының ақаулары
Күрделі нуклеин қышқылының бөлінуі жәнеалу:
★ Дәстүрлі ПТР технологиясы: қажет
★ ПТР алынған технология: қажет
★ ДНҚ және РНҚ үлгілері: үлкен айырмашылықтар, күрделі жұмыс талаптары
★ Ағзаға қауіп төндіретін факторлар: улы реагенттер ағзаға зиянын тигізеді
Дәстүрлі ПТР технологиясы мен туынды технологияның алғы шарты бар - нуклеин қышқылын бөлу және тазарту
Кез келген биологиялық үлгі ПТР технологиясының талаптарына сәйкес келетін нуклеин қышқылы үлгілерін алу үшін күрделі және жалықтыратын үлгілерді өңдеу сериясынан өтуі керек.
ДНҚ мен РНҚ бөлу және экстракциялау әрқашан тиісті ғылыми зерттеушілер күн сайын қайталау қажет негізгі міндет болды.
Үлгілер арасындағы үлкен айырмашылықтарға байланысты ДНҚ мен РНҚ-ны бөлу және экстракциялау процестері де өте әртүрлі.Бұл жұмыс операторлардан жоғары деңгейдегі техникалық біліктілікті талап етеді.Дәстүрлі бөлу және экстракция әдістері кейбір жоғары улы химиялық реагенттермен ұзақ уақыт байланыста болуды талап етеді.Ол оператордың денесіне қайтымсыз зақым келтіреді, тіпті эксперимент кезінде тікелей зақым келтіреді.
Сонымен қатар үлгілері көп адамдар үшін нуклеин қышқылдарын зерттеу, бөлу және алу көп еңбекті қажет ететін жұмыс болып табылады.
Нарықтағы нуклеин қышқылын оқшаулау және экстракциялау жинақтары қазір жетілген және көптеген брендтер бар, бірақ олар шамамен бірдей.Силикагельді мембраналық бағаналы центрифугалық жинақ немесе магнитті моншақ әдісінің жинағы болсын, ол көп уақытты қажет етеді және қымбатқа түседі.Жинақтың құнынан басқа, зертханалық жабдықтарға да арнайы талаптар қойылады.Магниттік моншақ әдісінде қолданылатын автоматтандырылған жұмыс станциясы өте типтік ауқымды жоғары құнды жабдық болып табылады, бұл зертхана үшін үлкен шығын.
Қысқаша
ПТР эксперименттерін жүргізбес бұрын үлгілерді алдын ала өңдеу зерттеушілер үшін сөзсіз және әрқашан бас ауруы болып табылады.Бұл мәселені қалай шешуге болады және ПТР эксперименттерін нуклеин қышқылдарын бөлусіз және экстракциясыз жүргізуге бола ма, жоқ па, әрқашан ғылыми зерттеушілер мен клиникалық зертхана қызметкерлерінің көпшілігінің ойы болды.
Foregene шешімі
Тікелей ПТР технологиясы және оған қатысты жинақтар бойынша көп жылдар бойы тыңғылықты зерттеулер жүргізгеннен кейін Форджен көптеген кедергілерден сәтті өтті және күшті қарсылық пен бейімделу қабілеті бар әртүрлі үлгілердің көптеген түрлері үшін тікелей ПТР-ға сәтті қол жеткізді, бұл зерттеушілерге нуклеин қышқылдарының ауыр және қауіпті бөлінуінен және экстракциясынан құтылуға мүмкіндік берді.Бұл әркімнің еңбек сыйымдылығын айтарлықтай азайтады, эксперимент процесін жылдамдатады және ғылыми зерттеулер мен сынақ шығындарын үнемдейді.
Фордженнің DirectPCR туралы түсінігі мен білімі
Біріншіден, DirectPCR технологиясы әртүрлі биологиялық үлгі тіндеріне арналған тікелей ПТР технологиясы болып табылады.Бұл техникалық жағдайда нуклеин қышқылдарын бөліп алудың және экстракциялаудың қажеті жоқ және тін үлгісі объект ретінде тікелей пайдаланылады, ал ПТР реакциясы үшін мақсатты ген праймерлері қосылады.
Екіншіден, DirectPCR технологиясы дәстүрлі ДНҚ үлгісін күшейту технологиясы ғана емес, сонымен қатар РНҚ үлгісі кері транскрипциялық ПТР кіреді.
Үшіншіден, DirectPCR технологиясы тін үлгілерінде әдеттегі сапалы ПТР реакцияларын тікелей орындап қана қоймайды, сонымен қатар реакция жүйесінің фондық флуоресценция кедергілеріне қарсы тұру және эндогенді флуоресценция сөндіргіштерге қарсы тұру қабілетінің күшті болуын талап ететін Нақты уақыттағы qPCR реакцияларын қамтиды.
Төртіншіден, DirectPCR технологиясымен бағытталған тін үлгілері тек нуклеин қышқылы үлгілерін шығаруды талап етеді және ПТР реакциясына кедергі келтіретін ақуыздарды, полисахаридтерді, тұз иондарын және т.б. алып тастамайды.Бұл реакция жүйесіндегі нуклеин қышқылы полимеразасы мен ПТР қоспасының тамаша қайтымдылығы мен бейімделгіштігін талап етеді және күрделі жағдайларда ферменттердің белсенділігі мен репликация дәлдігін қамтамасыз ете алады.
Бесіншіден, DirectPCR технологиясымен бағытталған тін үлгілері ешқандай нуклеин қышқылын байыту өңдеуіне ұшыраған жоқ және шаблон саны өте аз, бұл реакция жүйесінің өте жоғары сезімталдығы мен күшейту тиімділігін талап етеді.
Қорытынды
DirectPCR технологиясы ПТР технологиясы пайда болғаннан бергі соңғы 30 жылдағы ең маңызды технологиялық әзірлемелер мен инновациялардың бірі болып табылады.Forgene осы технологияның пионері және инноваторы болды және болып қала береді.
DirectPCR технологиясының қолдану перспективасы өте кең.Бұл технологияны үздіксіз жетілдіру және ілгерілету ғылыми зерттеулер мен тексеру жұмыстарына диверсиялық өзгерістер әкелетіні сөзсіз.Бұл ПТР технологиясының революциясы.
Хабарлама уақыты: 21 ақпан 2017 ж
