мРНҚ вакцинасы дегеніміз не
mRNA вакцинасы in vitro тиісті модификацияларынан кейін ақуыз антигендерін экспрессиялау және өндіру үшін РНҚ-ны дене жасушаларына тасымалдайды, осылайша ағзаны антигенге қарсы иммундық жауап береді, осылайша дененің иммундық қабілетін кеңейтеді.[1,3].
1-сурет: мРНҚ вакцинасының тікелей инъекциясының әсерінің схемалық диаграммасы [2]
мРНҚ вакциналарының классификациясы
мРНҚ вакциналары екі түрге бөлінеді:қайталанбайтынмРНҚ жәнеөзін-өзі күшейтумРНҚ: өзін-өзі күшейтетін мРНҚ мақсатты антигенді кодтап қана қоймайды, сонымен қатар жасушаішілік РНҚ күшейту мен ақуызды экспрессиялау механизмін қамтамасыз ететін репликацияны кодтайды.Репликацияланбайтын мРНҚ вакциналары тек мақсатты антигендерді кодтайды және 5' және 3' аударылмаған аймақтарды (UTR) қамтиды.Олар бейімділік пен туа біткен иммунитетті, атап айтқанда in situ антиген экспрессиясын және қауіп сигналын беруді жан-жақты ынталандыруды қамтамасыз етеді және келесі қолданбаларға ие.[2,3]
● Бейімделу қабілеті мен туа біткен иммунитетті, атап айтқанда in situ антиген экспрессиясын және қауіп сигналын беруді жан-жақты ынталандыруды қамтамасыз ете алады.
●Гуморальды және жасушалық эффекторларды және иммундық жадыны қоса алғанда, «теңдестірілген» иммундық жауапты тудыруы мүмкін.
●Вакцина құрастыру күрделілігін арттырмай, әртүрлі антигендерді біріктіре алады
●Иммундық потенциалды үздіксіз жақсартуға қайталап вакцинациялау арқылы қол жеткізуге болады және тасымалдаушыға иммундық жауап жоқ немесе аз болады.
●Ыстыққа төзімді мРНҚ вакциналары вакциналарды тасымалдау мен сақтауды жеңілдетеді
2-сурет: мРНҚ вакцинасының схемалық диаграммасы және оның антиген экспрессия механизмі [4]
мРНҚ вакциналарының ерекшеліктері
Дәстүрлі вакциналармен салыстырғанда, мРНҚ вакциналары қарапайым өндіріс процестеріне, жылдам даму жылдамдығына, жасуша культурасын қажет етпейді және төмен бағаға ие.ДНҚ вакциналарымен салыстырғанда, мРНҚ вакциналарының ядроға енуі қажет емес және иесінің геномына интеграциялану қаупі жоқ.Жартылай шығарылу кезеңін өзгерту арқылы реттеуге болады.
1-кесте: мРНҚ вакциналарының артықшылықтары мен кемшіліктері
|
| Артықшылық | Кемшілік |
| мРНҚ вакцинасы | Жылдам зерттеулер мен әзірлемелер, вакцинаны өндіру небәрі 40 күнді алады | Қажетсіз иммундық жауапты іске қосыңыз
|
| Физиологиялық жағдайларда мРНҚ тұрақсыздығы, ыдырауы оңай | Мүмкін терапевтік мутацияларды болдырмау үшін геномға біріктірілмейді
| |
| Кез келген ядролық локализация сигналы, транскрипция қажет емес | Ядролық қауіпсіздіктің тиімділігі әлі де тексерілуде
|
3-сурет: мРНҚ вакцинасын өндіру және дайындау ағынының диаграммасы [4]
Foregene вирустық РНҚ оқшаулау жинағы
RT-qPCR оңай (бір қадам)
mRNA вакциналарын дайындаудың жетілдірілген стратегиялары
мРНҚ-ның өзінің тұрақтылығының нашарлығына, тіндердегі нуклеазалардың жеңіл ыдырауына, жасушаға ену тиімділігінің төмен болуына және трансляция тиімділігінің төмен болуына байланысты бұл ақаулар мРНҚ вакциналарын қолдануды шектейді.Аударма тиімділігі де өте маңызды рөл атқарады.Жеткізу құралдарын вирустық векторларға және вирустық емес векторларға (соның ішінде липосомаларды, липосомаларды, вирустарды, нанобөлшектерді және т.б.) бөлуге болады.Сондықтан тиісті жақсарту шаралары қажет.Төменде мРНҚ дайындауға арналған фармакологиялық жақсарту стратегиясы берілген[2]
1 мРНҚ тұрақтандыру және эукариоттық трансляцияны бастау факторы 4E (EIF4E) арқылы ақуыз трансляциясын арттыру үшін қақпақ аналогтарын синтездеңіз немесе жабу ферменттерін пайдаланыңыз.
2 mRNA-ны тұрақтандыру және ақуыз трансляциясын арттыру үшін 5′-трансляцияланбаған аймақтағы (UTR) және 3′-UTR элементтерін реттеңіз.
3 Poly(A) құйрығын қосу мРНҚ-ны тұрақтандыруға және ақуыз трансляциясын арттыруға мүмкіндік береді
4 Туа біткен иммундық белсендіруді азайту және трансляцияны жоғарылату үшін модификацияланған нуклеозидтер
5 RNase III және жылдам ақуыз сұйық хроматографиясы (FPLC) тазартуымен емдеу иммундық белсендіруді азайтады және трансляцияны арттырады
6 Аударуды арттыру үшін тізбектерді немесе кодондарды оңтайландырыңыз
7 Трансляцияны бастау факторларын және аударма мен иммуногенділікті өзгертудің басқа әдістерін бірлесіп жеткізу
4-сурет: In vitro транскрипциясы (IVT) мРНҚ өндіру және құрастыру процесі [5]
Плазмидті ДНҚ-ның кең көлемде дайындалуы
Плазмидті ДНҚ тазарту негізінен РНҚ, ашық шеңберлі ДНҚ эндотоксині, негізгі ақуыз және иесі нуклеин қышқылы сияқты ластаушы заттарды жояды және әдетте рекомбинантты плазмидті E. coli-ге айналдырады.E. coli жоғары тығыздықтағы ашытудан, содан кейін қатты сұйықтықты бөлуден және ішек таяқшаларын жинаудан өтеді.Содан кейін E. coli сілтілі лизиске, центрифугалық қатты сұйықтықты бөлуге және лизистен кейін микрофильтрацияға, ультрафильтрацияға және тазартудан кейін концентрацияға, содан кейін хроматографиялық тазартуға ұшырайды.
Плазмидті ДНҚ тазарту:
Foregene General Plasmid шағын жинағы
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.мРНҚ疫苗研究进展及挑战[J].免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】Парди Н, Хоган М.Дж., Портер ФВ және т.б.мРНҚ вакциналары — вакцинологиядағы жаңа дәуір[J].Табиғат шолулары Drug Discovery, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) РНҚ вакциналарына кіріспе.In: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines.Молекулалық биологиядағы әдістер, 1499 том. Humana Press, Нью-Йорк, Нью-Йорк.
【4】Марудги Г, Чжан Ц, Ли Дж, т.б.mRNA жұқпалы ауруларды бақылау үшін вакцина жасаудың трансформациялық технологиясы ретінде[J].Молекулярлық терапия, 2019 ж.
【5】Серджио Линарес-Фернандес, Селин Лакруа, mRNA вакцинасын туа біткен/бейімделетін иммундық жауапты теңестіру, Молекулалық медицинадағы тенденциялар, 26 том, 3, 2020 жылғы басылым, 311-323 беттер.
Жіберу уақыты: 05 тамыз 2021 ж
