Тамшуыр ұштарын және ЭП түтіктерін зарарсыздандыру және т.б.
1. Дейондандырылған сумен 0,1% (мыңнан бір) DEPC (өте улы зат) дайындаңыз, оны сорғышта абайлап қолданыңыз және жарықтан 4°C алыс жерде сақтаңыз;
DEPC суы DEPC-пен өңделген және жоғары температура мен жоғары қысыммен зарарсыздандырылған таза су.RNase, DNase және протеиназа жоқ екендігі сыналған.
2. Тамшуыр ұшы мен EP түтігін 0,1% DEPC ішіне салып, тамшуыр ұшы мен EP түтігінің 0,1% DEP толтырылғанына көз жеткізіңіз.
3. Жарықтан қорғаңыз, тұрыңыз, түнде (12-24 сағ)
4. Ұшты және EP түтігі бар қорапты DEPC-ге малудың қажеті жоқ.Ұшындағы немесе EP түтігіндегі DEPC суын шамамен алып тастағаннан кейін оны орап, ораңыз.
5. 121 градус Цельсий, 30 мин
6. 180 градус Цельсий, бірнеше сағат құрғатыңыз (кем дегенде 3 сағат)
Ескерту: а.DEPC-мен жұмыс істегенде латекс қолғаптары мен бетперделерін киіңіз!b, немесе DEPC зарарсыздандырусыз, 130 ℃, 90 мин автоклав (көптеген зертханаларда жоғары температурада екі рет зарарсыздандыру)
РНҚ экстракциясы туралы ойлар
Тіндердің РНҚ оқшаулануының бұзылуының екі негізгі құбылысы
РНҚ ыдырауы және тіндердегі қоспалардың қалдықтары,деградацияға қатысты, алдымен өсірілген жасушалардан алынған РНҚ неліктен оңай бұзылмайтынын қарастырайық.Қолданыстағы РНҚ экстракциялау реагенттерінің барлығында RNase-ны жылдам тежейтін компоненттер бар.Өсірілген жасушаларға лизат қосып, оны жай ғана араластырыңыз, барлық жасушаларды лизатпен мұқият араластыруға болады, ал жасушалар толығымен лизиске ұшырайды.Жасушалар лизистен кейін лизаттың белсенді ингредиенттері жасушаішілік РНҚ-ны бірден тежейді, сондықтан РНҚ өзгеріссіз қалады.Яғни, өсірілген жасушалар лизатпен оңай және толық байланыста болғандықтан, олардың РНҚ оңай ыдырамайды;екінші жағынан, ұлпадағы РНҚ оңай бұзылады, өйткені тіндегі жасушалар лизатпен тез байланысуы оңай емес.жеткілікті байланысқа байланысты.Сонымен,РНҚ белсенділігін тежей отырып, ұлпаны бір жасушаға айналдыру тәсілі бар деп есептесек, деградация мәселесі толығымен шешілуі мүмкін.
Мұндай әдістің ең тиімдісі сұйық азотты ұнтақтау болып табылады.Дегенмен, сұйық азотты ұнтақтау әдісі өте қиын, әсіресе үлгілер саны көп болған кезде.Бұл келесі ең жақсы нәрсені тудырды: гомогенизатор.Theгомогенизаторәдіс жасушалардың лизатпен байланысқанға дейін RNase белсенділігі қалай тежеледі деген сұрақты қарастырмайды, керісінше тіннің бұзылуының жылдамдығы жасушаішілік RNase RN-ны ыдырататын жылдамдықтан жылдамырақ болуын сұрайды.
Электрлік гомогенизатордың әсері жақсы,ал шыны гомогенизаторының әсері нашар, бірақ жалпы алғанда гомогенизатор әдісі деградация құбылысын болдырмайды.Сондықтан, егер экстракция бұзылса, сұйық азотпен ұнтақтау үшін бастапқы электрлік гомогенизаторды пайдалану керек;бастапқы шыны гомогенизаторды электрлік гомогенизаторға ауыстыру немесе сұйық азотпен тікелей ұнтақтау керек.Мәселе 100% дерлік орындалады.шешілу.
Кейінгі эксперименттерге әсер ететін қоспа қалдығы мәселесі деградацияға қарағанда әртүрлі себептерге ие және сәйкесінше шешімдер әртүрлі.Қорытындысында,егер тінде деградация немесе қалдық қоспалар болса, нақты эксперименттік материал үшін экстракция әдісі/реагент оңтайландырылуы керек.Оңтайландыру үшін бағалы үлгілеріңізді пайдаланудың қажеті жоқ: базардан балық/тауық сияқты ұсақ жануарларды сатып алуға, РНҚ экстракциясы үшін материалдың сәйкес бөлігін алуға, ал ақуызды алу үшін екінші бөлігін – ауыз, асқазан және ішек сығындысымен ұсақтауға болады.
Алынған РНҚ-ның мақсатты РНҚ-сы әртүрлі кейінгі тәжірибелер үшін пайдаланылады және оның сапасына қойылатын талаптар әртүрлі
cDNA кітапханасының құрылысы ферменттік реакция ингибиторларының қалдықтарынсыз РНҚ тұтастығын талап етеді;Солтүстік РНҚ жоғары тұтастығын және ферменттік реакция ингибиторларының қалдықтарына төмен талаптарды талап етеді;RT-ПТР тым жоғары РНҚ тұтастығын қажет етпейді,бірақ ферменттік реакцияларды тежейді.Қалдық талаптары қатаң.Кіріс шығысты анықтайды;Мақсат ең жоғары таза РНҚ алу болған сайын, бұл адамдарға және ақшаға шығын әкеледі.
Үлгілерді жинау/сақтау
Деградацияға әсер ететін факторлар Үлгі тірі организмнен/немесе бастапқы өсу ортасынан шыққаннан кейін үлгідегі эндогендік ферменттер РНҚ-ны ыдырай бастайды,ал ыдырау жылдамдығы эндогендік ферменттердің мазмұнына және температураға байланысты.Дәстүрлі түрде эндогендік ферменттердің белсенділігін толығымен тежеудің екі жолы ғана бар: лизатты дереу қосып, мұқият және тез гомогенизациялау;кішкене кесектерге кесіп, сұйық азотта дереу мұздатыңыз.Екі тәсіл де жылдам әрекетті қажет етеді.Соңғысы барлық үлгілер үшін жарамды, ал біріншісі тек жасушалары мен эндогендік ферменттері аз және гомогенизациясы оңай тіндерге жарамды.Нақтырақ айтқанда, өсімдік ұлпасы, бауыр, тимус, ұйқы безі, көкбауыр, ми, май, бұлшықет тіндері және т.б. жалғастырмас бұрын сұйық азотпен мұздатылған дұрыс.
Үлгілерді фрагментациялау және гомогенизациялау
Деградацияға және кірістілікке әсер ететін факторлар Үлгі фрагменті болып табыладымұқият гомогенизациялау үшін, ол РНҚ-ның толық және толық шығарылуына арналған.Жасушаларды сындырмай тікелей гомогенизациялауға болады.Ұлпалар сынғаннан кейін ғана гомогенизациялануы мүмкін.Ашытқылар мен бактерияларды гомогенизациялау үшін оларды сәйкес ферменттермен ыдырату керек.Эндогендік ферменттердің мөлшері төмен және гомогенизациясы жеңіл тіндерді гомогенизатордың көмегімен лизатта бір уақытта ұсақтауға және гомогенизациялауға болады;өсімдік ұлпасы, бауыр, тимус, ұйқы безі, көкбауыр, ми, май, бұлшықет тіндері және басқа үлгілер, оларда эндогендік ферменттер көп немесе оңай гомогенизацияланбайды,сондықтан тіндердің бұзылуы және гомогенизациясы бөлек орындалуы керек.Фрагментацияның ең сенімді және ең өнімді әдісі сұйық азотпен фрезерлеу, ал гомогенизацияның ең сенімді әдісі - электрлік гомогенизаторды қолдану.Сұйық азотпен ұнтақтау туралы ерекше ескертпе: үлгіні бүкіл ұнтақтау процесі кезінде ерітуге болмайды, өйткені мұздатылған кезде эндогендік ферменттердің жұмыс істеу ықтималдығы жоғары.
Лизат таңдау
Жұмыс ыңғайлылығына және қалдық эндогендік қоспалардың факторларына әсер ету. Жиі қолданылатын лизистік ерітінділер RNase белсенділігін дерлік тежей алады.Сондықтан лизис ерітіндісін таңдаудың негізгі нүктесі тазарту әдісімен бірге қарастыру болып табылады.Бір ерекшелік бар:эндогендік ферменттердің жоғары құрамы бар үлгілерде эндогендік ферменттерді инактивациялау қабілетін арттыру үшін құрамында фенол бар лизатты қолдану ұсынылады.
Тазалау әдісін таңдау
Қалдық эндогенді қоспаларға әсер ететін факторлар, экстракция жылдамдығы Жасушалар сияқты таза үлгілер үшін қолдағы кез келген дерлік тазарту әдісімен қанағаттанарлық нәтижелерге қол жеткізуге болады.Бірақ көптеген басқа үлгілер үшін, әсіресе өсімдіктер, бауыр, бактериялар және т.б. сияқты қоспалары жоғары үлгілер үшін қолайлы тазарту әдісін таңдау өте маңызды.Бағананы центрифугалық тазарту әдісі жылдам экстракция жылдамдығына ие және РНҚ-ның кейінгі ферментативті реакциясына әсер ететін қоспаларды тиімді жоя алады, бірақ ол қымбат (Foregene үнемді жинақтарды ұсына алады, толығырақ ақпаратты басыңыз.Мұнда);LiCl жауын-шашын сияқты үнемді және классикалық тазарту әдістерін қолдану да қанағаттанарлық нәтижелерге қол жеткізе алады, бірақ жұмыс уақыты ұзақ..
РНҚ алу үшін «Үш пән және сегіз назар».
1-пән:Экзогендік ферменттердің ластануын тоқтату.
1-ескертпе:Маска мен қолғапты қатаң түрде киіңіз.
2-ескертпе:Тәжірибеге тартылған центрифуга түтіктері, ұшы бастары, тамшуыр таяқшалары, электрофорез цистерналары және тәжірибелік орындықтар мұқият жойылуы керек.
3-ескертпе:Экспериментке қатысатын реагенттер/ерітінділер, әсіресе су, RNase болмауы керек.
2-пән:Эндогендік ферменттердің белсенділігін тежеу
4-ескертпе:Сәйкес гомогенизация әдісін таңдаңыз.
5-ескертпе:Сәйкес лизатты таңдаңыз.
Ескертпе 6:Үлгінің бастапқы мөлшерін бақылаңыз.
3-пән:Экстракция мақсатыңызды нақтылаңыз
Ескертпе 7:Кез келген лизат жүйесі үлгінің максималды бастапқы мөлшеріне жақындағанда, экстракция сәттілігі күрт төмендейді.
Ескертпе 8:Табысты РНҚ экстракциясының жалғыз экономикалық критерийі өнім емес, кейінгі тәжірибелердегі табыс болып табылады.
RNase ластануының 10 негізгі көзі
1. Саусақтар экзогендік ферменттердің бірінші көзі болып табылады, сондықтан қолғаптарды жиі киіп, ауыстырып отыру керек.Сонымен қатар, маскалар да болуы керек, өйткені тыныс алу да ферменттердің маңызды көзі болып табылады.Қолғап маскасын киюдің қосымша артықшылығы экспериментаторды қорғау болып табылады.
2. Тамшуыр ұштары, центрифуга түтіктері, тамшуырлар – RNase тек зарарсыздандыру арқылы инактивацияланбайды, сондықтан тамшуыр ұштары мен центрифуга түтіктері DEPC өңделген деп белгіленген болса да, DEPC көмегімен өңделуі керек.Арнайы мақсаттағы тамшуырды қолданған дұрыс, оны қолданар алдында 75% спирт мақта шарымен, әсіресе таяқшамен сүртіңіз;сонымен қатар, бас кетіргішті қолданбауды ұмытпаңыз.
3. Суда/буферде RNase ластануы болмауы керек.
4. Сынақ үстелін кем дегенде 75% спирт мақта шариктерімен сүрту керек.
5. Эндогендік RNase Барлық ұлпаларда эндогендік ферменттер бар, сондықтан тіндерді сұйық азотпен тез мұздату ыдырауды азайтудың ең жақсы тәсілі болып табылады.Сұйық азотты сақтау/ұнтақтау әдісі шынымен де ыңғайсыз, бірақ бұл эндогендік ферменттердің деңгейі жоғары тіндер үшін жалғыз әдіс.
6. РНҚ үлгілері РНҚ экстракция өнімдерінің құрамында RNase ластануының іздері болуы мүмкін.
7. Плазмидтерді экстракциялау Плазмидтерді экстракциялау РНҚ-ны ыдырату үшін жиі Рназаны пайдаланады, ал қалдық Rnase протеиназа К-мен қорытылып, PCI арқылы экстракциялануы керек.
8. РНҚ қоймасы Төмен температурада сақталса да, РНҚ аз мөлшері РНҚ деградациясын тудырады.РНҚ-ны ұзақ сақтау үшін ең жақсы шешім тұз/спирт суспензиясы болып табылады, өйткені алкоголь төмен температурада барлық ферментативті белсенділікті тежейді.
9. Катиондарда (Ca, Mg) осы иондар болған кезде, 80С-та 5 минут бойы қыздыру РНҚ-ның ыдырауына әкеледі, сондықтан РНҚ-ны қыздыру қажет болса, консервациялау ерітіндісінің құрамында хелат түзетін агент (1мМ натрий цитраты, рН 6,4) болуы керек.
10. Кейінгі тәжірибелерде қолданылатын ферменттер RNase арқылы ластанған болуы мүмкін.
РНҚ алу үшін 10 кеңес
1: RNase белсенділігін жылдам болдырмау.Үлгілер жинаудан кейін тез мұздатады, ал RNase лизис кезінде жылдам операция арқылы инактивацияланады.
2: Рибозим мөлшері жоғары ұлпалар үшін сәйкес экстракция әдісін таңдаңыз, ал май тінінде фенол бар әдісті қолданған дұрыс.
3: Болжау сапасы Солтүстік, cDNA кітапханасының құрылысы жоғары тұтастықты қажет етеді, ал RT-PCR және RPA (Рибонуклеазаны қорғау талдауы) жоғары тұтастықты қажет етпейді.RT-ПТР жоғары тазалықты қажет етеді (фермент тежегіштерінің қалдықтары).
4: Мұқият гомогенизация - өнімділікті арттырудың және деградацияны азайтудың кілті.
5: РНҚ электрофорезін анықтаудың тұтастығын тексеріңіз, 28S: 18S = 2: 1 - толық белгі, 1: 1 көптеген эксперименттер үшін де қолайлы.
6: RT-ПТР үшін ДНҚ-ны жою, массивтерді талдау ДНҚ-ны жою үшін Dnase I қолданған дұрыс.
7: Экзогендік ферменттердің ластануын азайтыңыз – ферменттерді сырттан әкелуге болмайды.
8: Төмен концентрациялы нуклеин қышқылын концентрациялағанда, бірге тұндыру реагентін қосу керек.Бірақ құрамында ферменттер және ДНҚ ластануын қосатын преципитантты болдырмау үшін.
9: РНҚ-ны мұқият ерітіңіз, қажет болса, 5 минут бойы 65С қыздырыңыз.
қолайлы сақтау әдісі
Оны –20С-та қысқа мерзімге, ал –80С-те ұзақ сақтауға болады.РНҚ шығымдылығын жақсартудың бірінші қадамы әртүрлі үлгілердің РНҚ мазмұны айтарлықтай өзгеретінін түсіну болып табылады.Бауыр, ұйқы безі, жүрек сияқты жоғары молшылық (2-4гг/мг), ми, эмбрион, бүйрек, өкпе, тимус, аналық без сияқты орташа молшылық (0,05-2г/мг), қуық, сүйек, май сияқты аз мөлшерде (<0,05 мг/мг) мг).
1: RN босату үшін жасушаларды лизис - егер РНҚ босатылмаса, кірістілік төмендейді.Электр гомогенизациясы басқа гомогенизация әдістеріне қарағанда жақсы жұмыс істейді, бірақ сонымен бірге сұйық азотты езгілеу, ферментативті ас қорыту (Лизоцим/Литиказа) сияқты басқа әдістермен біріктіру қажет болуы мүмкін.
2: Экстракция әдісін оңтайландыру.Фенол негізіндегі әдістердің ең үлкен проблемалары толық емес стратификация және РНҚ-ның ішінара жоғалуы болып табылады (супернатант толығымен жойылмайды).Толық емес стратификация нуклеин қышқылының және ақуыздың жоғары болуына байланысты, оны қолданылатын лизат мөлшерін көбейту немесе үлгі мөлшерін азайту арқылы шешуге болады.Майлы тінге хлороформды экстракциялау сатысы қосылды.РНҚ жоғалуын кері айдау немесе органикалық қабатты алып тастау, содан кейін центрифугалау арқылы азайтуға болады.Бағандарды центрифугалауға негізделген әдістердің ең үлкен проблемасы артық үлгі болып табылады.
Классикалық экстракция бойынша кеңестер
1. Фенолды тазарту: 1:1 фенол/хлороформның бірдей көлемін қосып, 1-2 минут бойы қатты араластырыңыз.2 минут бойы жоғары жылдамдықпен центрифугалаңыз.Үстіндегі сұйықтықты (80-90%) абайлап алыңыз.Ешқашан ортаңғы қабатқа түспеңіз.Фенол/Хлороформға реакция ерітіндісінің бірдей көлемін қосып, үстіңгі затты алып тастауға болады.Шығымды жақсарту үшін екі супернатантты нуклеин қышқылын тұндыру үшін араластыруға болады.Араластыру кезінде тым жұмсақ болмаңыз және барлық үстіңгі затты кетіруге тырыспаңыз.
2. 70-80% этанолмен жуу: Жуу кезінде қалдық тұздың жуылуын қамтамасыз ету үшін нуклеин қышқылын тоқтата тұру керек.Бұл ретте этанолды төгіп болғаннан кейін бірден бірнеше секунд жоғары жылдамдықпен центрифугалайды, содан кейін тамшуырмен қалдық этанолды алып тастайды.Бөлме температурасында 5-10 минут тұрғаннан кейін ерітіңіз.
11. Арнайы ұйымдарды шығару
1. Талшықты тін: жүрек/қаңқа бұлшықеті сияқты талшықты тіннен РНҚ алудың кілті матаны толығымен бұзу болып табылады.Бұл ұлпалардың жасушалық тығыздығы төмен, сондықтан ұлпаның бірлік салмағына шаққандағы РНҚ мөлшері аз, сондықтан мүмкіндігінше бастапқы мөлшерді қолданған дұрыс.Мұздату жағдайында матаны мұқият ұнтақтауды ұмытпаңыз.
2. Ақуыз/май мөлшері жоғары ұлпалар: ми/өсімдік майы жоғары.PCI экстракциясынан кейін үстіңгі қабатта ақ флоккулалар бар.Жоғарғы затты хлороформмен қайтадан экстракциялау керек.
3. Нуклеин қышқылы/рибозим мөлшері жоғары ұлпалар: көкбауырда/тимуста нуклеин қышқылы мен рибозим мөлшері жоғары.Мұздату жағдайында тіндерді ұнтақтау, содан кейін жылдам гомогенизация рибозимдерді тиімді түрде инактивациялауы мүмкін.Алайда, егер лизат тым тұтқыр болса (нуклеин қышқылының жоғары болуына байланысты), PCI экстракциясы тиімді стратификация жасай алмайды;қосымша лизат қосу бұл мәселені шеше алады.Бірнеше PCI экстракциясы көбірек қалдық ДНҚ-ны жоя алады.Егер спиртті қосқаннан кейін бірден ақ тұнба пайда болса, бұл ДНҚ ластануын көрсетеді.Ерігеннен кейін қышқылды PCI көмегімен қайта экстракция ДНҚ ластануын жоя алады.
4. Өсімдік ұлпасы: Өсімдік ұлпасы жануарлар ұлпасына қарағанда күрделірек.Әдетте, өсімдіктер сұйық азот жағдайында ұнтақталған, сондықтан эндогендік ферменттермен РНҚ ыдырауы сирек кездеседі.Егер деградация мәселесі шешілмесе, бұл үлгідегі қоспалардан туындайтыны сөзсіз.Көптеген өсімдіктердің құрамындағы қоспалар қалдықтарға әкеледі және қалдықтардың себебі көбінесе бұл қоспалардың РНҚ-ға ұқсастықтары бар: сіз тұндырасыз және мен тұндырамын, ал сіз адсорбциялаймын және мен адсорбциялаймын.Бұл сипаттамалар олардың өте күшті фермент ингибиторлары екенін анықтайды.
Қазіргі уақытта коммерциялық РНҚ экстракциялау реагенттері шағын түзетулермен жануарлардың барлық дерлік тіндеріне бейімделуі мүмкін, бірақ көптеген өсімдік тіндері үшін қолайлы болатын коммерциялық РНҚ экстракциялау реагенттері аз.Бақытымызға орай, Foregene ерекше қамтамасыз ете аладыөсімдік РНҚ экстракциялық жинақтары, бізде барӨсімдіктердің жалпы РНҚ оқшаулау жинағы, Өсімдіктердің жалпы РНҚ оқшаулау жинағы Plus.Соңғысы полисахарид пен полифенол мөлшері жоғары өсімдіктер үшін арнайы жасалған.РНҚ экстракциясы үшін зертханалық пайдаланушылардың кері байланысы әсіресе жақсы.
12. Үлгіні мұздату және еріту әсері Мұздатылған үлгі үлкенірек болуы мүмкін және оны РНҚ экстракциясы үшін пайдаланбас бұрын кесу қажет.Үлгілер кесу кезінде еріп кетеді (мүмкін ішінара).Мұздатылған үлгілерді РНҚ экстракциясы алдында өлшеу қажет болуы мүмкін және бұл процесс барысында еріту міндетті түрде болады.Кейде үлгінің еруі сұйық азотты ұнтақтау процесінде де болады;немесе мұздатылған үлгі сұйық азотты ұнтақтаусыз лизатқа тікелей қосылады және еріту толық гомогенизацияға дейін міндетті түрде болады.Тәжірибе көрсеткендей, мұздатылған ұлпа балғын тіндерге қарағанда еріту кезінде РНҚ ыдырауына бейім болады.Ықтимал себебі: мұздату-еріту процесі жасуша ішіндегі құрылымдарды бұзады, бұл эндогендік ферменттердің РНҚ-мен тікелей байланысын жеңілдетеді.
13. РНҚ сапасын бағалау Әдетте, электрофорез РНҚ тұтастығын бағалау үшін қолданылады, ал A260/A280 РНҚ тазалығын бағалау үшін қолданылады.Теорияда бұзылмаған РНҚ 28S:18S = 2,7:1 қатынасына ие және көптеген деректерде 28S:18S = 2:1 қатынасына баса назар аударылады.Жасушалардан басқа үлгілерден алынған РНҚ-ның ешқайсысы дерлік 2:1 қатынасында емес (бұл Agilent Bioanalyzer көмегімен алынған).
РНҚ электрофорезінің нәтижелеріне көптеген факторлар әсер етеді, соның ішінде қайталама құрылым, электрофорез жағдайлары, үлгі жүктемесі, EB қанықтыру дәрежесі және т.б. РНҚ анықтау үшін табиғи электрофорезді пайдаланыңыз және бақылау ретінде ДНҚ маркерін пайдаланыңыз.28S 2kb және 18S 0,9kb анық және 28S: 18S > 1 болса, тұтастық көптеген кейінгі эксперименттердің талаптарына жауап бере алады.
A260/A280 - бұл көптеген шатасулар тудырған көрсеткіш.Ең алдымен, нуклеин қышқылдары үшін бұл көрсеткіштің бастапқы мағынасын нақтылау қажет: таза РНҚ, оның A260/280 = шамамен 2,0.Таза РНҚ «себеп» және A260/A280 = 2 «әсер» болып табылады.Қазір барлығы A260/A280-ді «себеп» ретінде пайдаланып, «егер A260/A280 = 2 болса, онда РНҚ таза» деп ойлайды, бұл әрине шатасуға әкеледі.
Егер сізді қызықтырса, РНҚ үлгісіне фенол, гуанидин-изотиоцианат, PEG және т.б. сияқты экстракцияда жиі қолданылатын кішкене реагент қосып, содан кейін A260/A280 арақатынасын өлшей аласыз.Шындық мынада, РНҚ экстракциясы үшін қолданылатын көптеген реагенттер, сондай-ақ үлгідегі көптеген қоспалар A260/A280-ге әсер ететін A260 және A280 шамасында сіңіреді.
Қазіргі уақытта ең нұсқаулық әдіс - 200-300 нм диапазонында РНҚ үлгілерін сканерлеу.Таза РНҚ қисығының келесі сипаттамалары бар: қисық тегіс, A230 және A260 - екі иілу нүктесі, A300 - 0-ге жақын, A260/A280 = 2,0 және A260/A230 = 2,0 шамасында.Сканерлеу деректері қол жетімді болмаса, A260/A230 арақатынасын да анықтау керек, өйткені бұл арақатынас ферментативті реакцияға әсер ететін барлық қоспалардың тасымалдануына неғұрлым сезімтал.Құрылғының сызықтық диапазонын ескеріңіз (A260 үшін 0,1–0,5).
Тағы екі пайдалы құбылыс бар: A260/A280 суда өлшенгенде қатынас шамамен 0,3 төмен болады;ал 10 мМ ЭДТА-да өлшенген қатынас 1 мМ ЭДТА-да өлшенгеннен шамамен 0,2 жоғары.
Қосымша тауарлар:
Қытай зауытының жалпы РНҚ оқшаулау жинағы өндірушісі және жеткізушісі |Foregene (foreivd.com)
РНҚ оқшаулау сериясы – Foregene Co., Ltd. (foreivd.com)
Жіберу уақыты: 15 шілде 2022 ж
